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阿魏酸温敏凝胶改善脊髓损伤作用及机制研究

编辑:sts 内容来源:未知 时间:2017-03-14
• 文章导读
目的制备阿魏酸温敏凝胶,并进行了质量评价,结合原位注射技术探究阿魏酸温敏凝胶改善脊髓损伤作用及其机制。方法1.选用泊洛沙姆407为主要基质,结合冷法制备方法制备阿魏酸温敏凝胶,对其胶凝温度、相转变温度、稳态黏度进行了测定,并应用扫描电镜技术观察了其微观结构筛选出具有适宜胶凝温度、力学强度以及良好的三维形态,符合原位注射要求的温敏载药凝胶制剂。2.采用
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             目的制备阿魏酸温敏凝胶,并进行了质量评价,结合原位注射技术探究阿魏酸温敏凝胶改善脊髓损伤作用及其机制。方法1.选用泊洛沙姆407为主要基质,结合冷法制备方法制备阿魏酸温敏凝胶,对其胶凝温度、相转变温度、稳态黏度进行了测定,并应用扫描电镜技术观察了其微观结构筛选出具有适宜胶凝温度、力学强度以及良好的三维形态,符合原位注射要求的温敏载药凝胶制剂。2.采用脊髓夹闭法建立SD大鼠脊髓损伤模型,用于考察阿魏酸温敏凝胶联合原位注射技术对脊髓损伤模型动物的治疗作用。实验设置了假手术组、模型组、阿魏酸溶液组以及阿魏酸凝胶组分别进行分组给药。通过第Oh,6h,Id,3d, 7d对各实验组大鼠进行运动功能学评分;对其T8-T10段受损脊髓分别进行了HE染色病理学指标检测,免疫组化及Western-Blot多个相关蛋白的检测,药理学和分子生物学相结合,从分子药理层面上初步揭示阿魏酸水凝胶改善脊髓损伤的作用机制。

        结果
        1.本实验制备的阿魏酸温敏凝胶的胶凝温度为37℃,采用泊洛沙姆407浓度为17%的优化处方,具有适宜的力学强度和弹性模量,SEM镜下观察凝胶呈多孔三维网状结构,可以作为原位注射给药的研究。

        2.建立的SD大鼠脊髓损伤模型简单易行、稳定可靠,成模率近100%。为后续研究脊髓损伤原位注射治疗方法提供了操作平台。

        3.阿魏酸温敏凝胶经原位注射给药后展现出良好的治疗脊髓损伤作用,阿魏酸水凝胶组脊髓损伤大鼠的运动功能恢复情况最好;HE染色结果在病理学层面证明阿魏酸水凝胶有显著改善脊髓损伤的作用;免疫组化检测了LC-3 Beclin-1蛋白,Western Blot检测了LC-3、Beclin-1、Bcl-2和Bax蛋白,证明阿魏酸水凝胶经原位注射给药具有强大的改善脊髓损伤功能,并从分子层面揭示了脊髓损伤治疗与自噬抑制凋亡的机制有关。结论本研究表明,阿魏酸水凝胶联合原位注射技术可显著增强阿魏酸对脊髓损伤的治疗作用。泊洛沙姆407水凝胶包载<b>医学论文发表</b>药物阿魏酸在保护其活性的同时还起到骨架支撑作用,结合原位注射给药的方式实现了阿魏酸的局部长效释放,有效提高了阿魏酸对脊髓损伤的治疗作用,克服了目前阿魏酸稳定性差,生物利用度低,局部给药药效持续时间短的瓶颈,为脊髓损伤的高效治疗提供一种新的策略。
       
       中文摘要5-7ABSTRACT7-9中英文缩略词表9-10前言10-12第一部分 阿魏酸温敏凝胶的制备和质量评价12-17一、材料与方法12-13(一) 实验材料121. 实验试剂122. 实验仪器12(二) 实验方法12-131. FA温敏凝胶的制备122. 制备不同泊洛沙姆407浓度的FA温敏凝胶123. FA温敏凝胶的质量评价12-133.1. 胶凝温度的测定12-133.2. 相转变温度的测定133.3. 稳态黏度的测定133.4. 扫描电镜微观形态结构观察13二、结果13-15(一) FA温敏凝胶胶凝温度的测定13-14(二) FA温敏凝胶相转变温度的测定14-15(三) FA温敏凝胶的扫描电镜结构15三、分析与讨论15-16四、小结16-17第二部分 原位注射FA温敏凝胶对脊髓损伤模型动物的治疗作用及机制研究17-30一、材料与方法17-21(一) 实验材料171. 实验动物172. 实验药品与试剂173. 实验仪器17(二) 实验方法17-211. 大鼠SCI模型的建立17-182. 动物分组和处理183. BBB运动能力评分18-194. 斜板功能评分195. 脊髓组织取材及标本制备196. HE染色19-207. 免疫组化检测LC3和Beclin-1表达208. Western Blot检测LC3,Beclin-1,Bcl-2和Bax蛋白表达20-219. 统计分析21二、结果21-26(一) 大鼠脊髓损伤模型的建立21(二) 行为学评价21-22(三) HE染色结果22-23(四) 免疫组化检测23-25(五) Western Blot检测25-26三、分析与讨论26-28四、小结28-30结论30-32参考文献32-36附表36-38致谢38-39文献综述 阿魏酸对多种疾病作用的研究39-47参考文献43-47
 
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